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DNA采血卡不同環(huán)境條件下血痕中微RNA穩(wěn)定性研究
DNA采血卡的提取研究背景在法醫(yī)現(xiàn)場勘驗(yàn)工作中常遇到不同種類的體液斑跡,如血痕、精斑、唾液斑、汗?jié)n等,其中血痕是犯罪現(xiàn)場中最常見的生物檢材,也是法醫(yī)物證檢驗(yàn)工作中最重要的檢測項(xiàng)目之一。血液一旦離開人體,便在載體上逐漸形成血痕(跡),且面臨外界物理、化學(xué)以及生物學(xué)等多種因素的作用和影響,導(dǎo)致其污染、降解、腐敗過程十分迅速。此外,隨著血痕的老化,其內(nèi)部成分不斷發(fā)生改變,其中大分子蛋白質(zhì)、DNA及RNA破壞會(huì)增加血痕檢驗(yàn)的難度。故血痕的檢驗(yàn)過程及難度也高于臨床血液檢驗(yàn),且血痕的腐敗嚴(yán)重影響其檢測結(jié)果,如何準(zhǔn)確、高效地對遺留于犯罪現(xiàn)場中的血痕進(jìn)行識別,是法醫(yī)檢案工作中必須解決的關(guān)鍵問題。MiRNA作為一類單鏈內(nèi)源性非編碼小RNA分子(22個(gè)左右核苷酸),其表達(dá)具有高度的組織特異性和時(shí)序性,并且不易降解(強(qiáng)穩(wěn)定性)等特征。這些優(yōu)勢為應(yīng)用于法醫(yī)工作中提供基礎(chǔ),使其在法醫(yī)物證學(xué)檢測方面(如體液、組織識別等)具有重要的意義和良好的應(yīng)用前景,目前已有大量文獻(xiàn)證實(shí)可作為血液特異性分子標(biāo)志物。與此同時(shí),miRNA雖具有較強(qiáng)的穩(wěn)定性,但理論上而言,其仍會(huì)受到RNA酶的影響。既往臨床研究通常將血液樣本置于冰凍條件下保存來進(jìn)行miRNA的穩(wěn)定性研究,以找尋其最佳存儲(chǔ)條件。近年來有研究者將血液、精液、唾液等制作成體液斑跡后,初步探討其中miRNA的降解規(guī)律。而在法醫(yī)現(xiàn)場勘驗(yàn)工作中遇到的生物檢材多為微量物證,且常存在于室內(nèi)或室外(自然條件),甚至遭到人為破壞(水洗或高溫處理等);此外在法醫(yī)物證工作方面,對生物檢材的長期保存是其重要工作之一。目前多在實(shí)驗(yàn)室條件下(室溫、低濕、避光)保存,而該存儲(chǔ)條件對其中miRNA的穩(wěn)定性的影響尚未可知。故探討不同環(huán)境條件下血痕樣本中miRNA的穩(wěn)定性及時(shí)序性規(guī)律,判斷miRNA應(yīng)用于體液來源鑒定方面的潛力,進(jìn)而確定血痕檢材的最佳存儲(chǔ)條件顯得尤為重要。
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