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從(DBS)提取采血卡DNA更簡(jiǎn)單快速
DNA采血卡干血斑(DBS)樣品是淋巴細(xì)胞顆粒的一種有趣的替代品,因?yàn)橹恍枰獛椎窝翰⑶铱梢灾苯邮占?/span>DNA采血卡濾紙上。濾紙的儲(chǔ)存和運(yùn)輸很容易,因?yàn)樗鼈兛梢员3衷谑覝叵?,并且DNA在干燥樣品中具有良好的穩(wěn)定性。最后,自1991年( 3 - 5 )以來(lái),DBS已被用于通過(guò)PCR檢測(cè)HIV-1基因組,具有良好的靈敏度和特異性。
然而,先前關(guān)于DBS中DNA檢測(cè)的研究,經(jīng)常應(yīng)用具有多個(gè)提取步驟的勞動(dòng)密集型方案,這些方法在現(xiàn)場(chǎng)不易進(jìn)行。最近的一項(xiàng)研究使用DBS直接作為PCR的模板,靈敏度為95.4%。因此簡(jiǎn)化了提取步驟,但仍需要商業(yè)洗滌緩沖液。更重要的是,僅擴(kuò)增了pol基因的一個(gè)區(qū)域。
DNA采血卡廠家在這里介紹一項(xiàng)關(guān)于HIV-1感染垂直傳播的研究,我們的目標(biāo)是開(kāi)發(fā)一種簡(jiǎn)單快速的方法從DBS中提取DNA,以及比較兩種PCR檢測(cè):內(nèi)部巢式PCR和Amplicor DNA原型檢測(cè)1.5版,已經(jīng)證明是敏感的在EDTA和細(xì)胞沉淀中檢測(cè)全血中的HIV-1 DNA。